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http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1 ... D07.d01t02
Evelien WM Kemna, Wolbers piso, Istvan Vermes, Albert van den BergArtículo publicado por primera vez en línea: 25 OCT 2011
Microfluídica y miniaturización
El chip de electrofusión de células B humanas individuales y las células de mieloma de ratón para la generación de hibridomas eficiente
Abstracto
En este artículo se describe el desarrollo y la caracterización completa de un chip de microfluidos para electrofusión de sangre periférica humana de células B y de mieloma de ratón (NS-1) para generar células de hibridomas. El chip consiste en una serie de 783 trampas, con dimensiones que han sido optimizados para obtener una eficiencia de las células de emparejamiento final de 33 ± 6%. Las células B se tiñeron con una tinción citoplásmica CFDA para evaluar las diferentes etapas de la fusión de células, es decir, transferencia de tinte para NS-1 en las células (inicio de la fusión) y la reorganización de membrana (fusión avanzada). Seis pulsos DC de 100 ms (2,5 kV / cm), combinado con un campo de CA (30 s, 2 MHz, 500 V / cm) y el tratamiento pronasa dio lugar a la mayor eficiencia de electrofusión de células pareadas (51 ± 11%). La formación de hibridoma, con un rendimiento de 0,33 y un 1,2%, se observó después el cultivo de las células fusionadas durante 14 días en medio condicionado. Este trabajo proporciona lleva valiosa para mejorar los protocolos actuales de electrofusión para la producción de anticuerpos humanos para aplicaciones diagnósticas y terapéuticas.
Abrazos fercu y mary
